Vien Sot ret Ky Sinh Trung - Con trung Quy Nhon

Cùng với sư nghiên cứu và phát triển nhiều loại test chẩn đoán nhan chẩn đoán và phát hiện ca bệnh sốt rét ở người thì các nhà nghiên cứu cũng đã tập trung nghiên cứu các thử nghiêm nhanh, nhạy và đặc hiệu nhằm phát hiện sự có mặt của kháng nguyên của tác nhân trưởng thành hay thoi trùng của ký sinh trùng, đặc biệt là ký sinh trùng sốt rét. Một trong số các thành công đó cho ra đời thành phẩm Vectest.

Thử nghiệm hay xét nghiệm chẩn đoán nhanh VecTest là một thử nghiệm/xét nghiệm dựa vào kháng nguyên được thiết kế dựa trên hệ thống phân tích y khoa ở Mỹ để phát hiện và chẩn đoán đặc hiệu cho một số bệnh do virus West Nile, bệnh viêm não do virus St. Louis và viêm não EE (EEE_Eastern Equine Encephalitis). Đó là các test chẩn đoán nhanh, phát hiện sự có mặt kháng nguyên trong các dịch và thành phần lấy từ các con muỗi có nhiễm các loại virus, ký sinh trùng. Nếu các bệnh trên có mặt kháng nguyên của virus nhiễm vào sẽ gắn với những kháng thể đặc hiệu trên que thử, sinh ra một phản ứng có màu đỏ trên que hay tạo phức hợp kháng nguyên kháng thể. Sau đó, xét nghiệm viên sẽ đọc và phiên giải kết quả.

Thử nghiệm cho biết rằng nếu có kháng nguyên thì thử nghiệm mới dương tính, nên nó không có giá trị định lượng virus trong mẫu máu mà chỉ mang tính định tính. Mặc dù, qua thực hành và nghiên cứu cho thấy dường như đậm độ màu của phản ứng có liên quan tương đối đến lượng virus của mẫu thử, nhưng số lượng virus nhiễm bao nhiêu thì không thể xác định hoặc lượng virus do một hay nhiều con muỗi nhiễm sinh ra trong cùng một mẫu cũng không thể biết.

VecTest^® có thể phát hiện virus hoặc các thoi trùng trong cơ thể muỗi

Một xét nghiệm nhanh chẩn đoán miễn dịch Vectest để phát hiện sự có mặt của thoi trùng sốt rét Plasmodium spp. trong muỗi nhiễm có các đặc tính gồm cho kết quả nhanh trong vòng 15 phút, dễ dàng phiên giải kết quả, ổn định với nhiệt độ môi trường thử nghiệm/xét nghiệm, rất đặc hiệu và không có thất tỷ lệ dương tính giả. Test này được công nhận là một test đặc hiệu trong sàng lọc muỗi nhiễm ký sinh trùng sốt rét do Trung tâm Phòng chống bệnh tật của Mỹ (Center for Disease Control_US.CDC).

Trong suốt mùa phát triển và hoạt động của muỗi, các nhà khoa học đã thu thập khoảng 50 con muỗi trưởng thành để kiểm tra sự có mặt của virus WNV/SLE/EEE hay không. Một lô muỗi được bắt khoảng 50 con với bất kỳ chủng loại nào có thể lan truyền virus và mang virus. Vì muỗi Culex spp. ở vùng ao tù, nước đọng là loại muỗi đầu tiên được kiểm tra với virus WNV và SLE. Ưu điểm của việc dùng các bẫy muỗi đặc biệt là nhằm vào đích các con muỗi cái Culex spp. Các chậu của bẫy này được làm đầy với nước ao tù, nước có nhiều thực vật thủy sinh để tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình nhân lên của ấu trùng và nơi ở của muỗi Culex spp. diễn ra một cách bình thường. Các muỗi Culex spp. cái sẽ ăn máu và tự chúng di chuyển sang chỗ khác thích hợp để đẻ trứng thuận lợi.

Tiếp đó, các muỗi Culex spp. đó lại bị bắt vào bẫy muỗi, nếu hút máu từ các vật chủ nhiễm các loại virus WNV, SLE hoặc EEE thì chúng sẽ sinh ra phản ứng dương tính với que thử Vectest.

Bằng cách ghi nhận số liệu các ca dương tính, các nhà khoa học có thể giám sát sự phân bố và tỷ lệ các loại virus này trong một vùng nào đó. Một mẫu Vectest với muỗi dương tính có nghĩa là muỗi tại chỗ đó nhiễm virus và có khả năng lan truyền đến các vật chủ khác, trong đó có cả con người.

Độ nhạy của thử nghiệm VecTest sẽ giúp cho cán bộ y tế an tâm sử dụng để phát hiện các muỗi nhiễm mầm bệnh lây truyền bệnh cho người. Xét nghiệm một loạt thử nghiệm Vectest với các muỗi nhiễm từ các vùng địa lý giống nhau dương tính chỉ ra có sự gia tăng nguy cơ mắc virus West Nile, đặc biệt vào khoảng tháng 7 đến tháng 9 hàng năm ở bang Illinois, Mỹ. Thông qua tổng hợp số liệu kết quả của một số nghiên cứu VecTest và toàn bộ số muỗi thu thập được qua hồ sơ giám sát các con chim và số ngựa cũng như dữ liệu nhiễm virus ở người, chúng ta có thể nắm bắt được vấn đề và tăng khả năng phòng chống, giảm nguy cơ lây truyền bệnh cho người.

Để xác định các chủng loại và quần thể muỗi Anopheles spp. truyền ký sinh trùng sốt rét ở bất kỳ tình huống nào, thử nghiệm miễn dịch để phát hiện kháng nguyên thoi trùng (sporozoite antigen) ký sinh trùng sốt rét có thể thay thế cho phương pháp soi mổ muỗi tìm thoi trùng cổ điển. Người ta cũng phát minh ra một bấc dùng muỗi để xác định sự có mặt hay vắng mặt các proteine kết cụm có tiếp thụ thể đặc hiệu (specific peptide epitopes of circumsporozoite protein) của loài ký sinh trùng Plasmodium falciparum và 2 dòng của ký sinh trùng Plasmodium vivax có biến thể là 210 và 247.

Hiệu quả của thử nghiệm VecTest là nhanh chóng, có quy trình thao tác đơn giản, sử dụng que nhúng có khả năng phát hiện và phân biệt giữa nhiễm loại P. falciparum và P. vivax qua kháng nguyên thoi trùng đặc hiệu trong muỗi. Các nghiên cứu cũng đã đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu, tính ổn định và tính dễ chấp nhận của người sử dụng loại công nghệ que nhúng này.

Độ nhạy của thử nghiệm phát hiện kháng nguyên VecTest cho phép xác định có mặt virus EEE và WEE, đó chính là nghiên cứu của Trung tâm phòng chống bệnh tật, Đơn vị Phòng chống bệnh truyền nhiễm do vector truyền (US.CDC, Division of Vector-Borne Infectious Diseases) của Mỹ.

Que thử VecTest phát hiện kháng nguyên virus gây bệnh viêm não EEE và WEE trong muỗi, được đánh giá và xác định độ nhạy và độ đặc hiệu khi so sánh với test chuẩn với độ tin cậy cao. Cả hai thử nghiệm phát hiện kháng nguyên virus trong muỗi và cho kết quả dương tính, âm tính giống nhau. Không có bằng chứng cho thấy có phản ứng chéo gây dương tính giả ở bất kỳ các test nào đưa ra thử nghiệm.

Một nghiên cứu khác tiến hành tại 16 trung tâm thử nghiệm trên thế giới đánh giá hơn 40.000 que này, so sánh chúng với test ELISA chuẩn cho protein kết cụm (CS). Kết quả cho biết VecTest có độ nhạy 92%, đặc hiệu 98,1%, độ chính xác 97,8%. Trong điều kiện bảo quản, tính ổn định của test đều hơn 15 tuần ở điều kiện khô đến 45⁰C và độ ẩm tương đối. Bằng chứng cho thấy que thử Vectest dễ sử dụng và cho kết quả nhanh, đạt độ tin cậy và cho ra các lợi điểm về thực hành áp dụng các test này trên thực địa để giám sát và điều tra vector sốt rét.

VecTest thích hợp cho phát hiện muỗi sốt rét Anopheles spp. trên thực địa

Thử nghiệm que nhúng Vectest phù hợp cho xét nghiệm điều tra tại thực địa để xác định muỗi mang thoi trùng ký sinh trùng sốt rét. Trong một nghiên cứu gần đây, các nhà khoa học thuộc trường Đại học quốc gia Ghana đã so sánh Vectest với kỹ thuật ELISA chuẩn (standard circumsporozoite microplate ELISA) trong việc xác định thoi trùng Plasmodium spp. trong muỗi sốt rét Anopheles spp. Những con muỗi thu thập được từ các vùng sốt rét lưu hành ở quận Kassena Nankana, bắc Ghana, kết quả cho thấy trong 2.620 mẫu muỗi thu thập ngẫu nhiên được làm CS-ELISA chuẩn cho kết quả và độ chính xác trên 98% so với Vectest.

Sử dụng kỹ thuật PCR để xác định lại kết quả sàng lọc của Vectest trong nghiên cứu phát hiện Plasmodium falciparum và Plasmodium vivax biến thể VK 210 trong muỗi Anopheles spp. nhiễm. Họ cũng đã so sánh phối hợp VecTest, ELISA, PCR để phát hiện Plasmodium falciparum và Plasmodium vivax biến thể VK 210. Mỗi muỗi được làm 3 que Vectest. Kết quả Vectest và ELISA phù hợp nhau. DNA từ các mẫu để làm kỹ thuật PCR, tất cả mẫu P. vivax đều dương tính PCR nhưng một số đòi hỏi quy trình bổ sung loại bỏ các chất ức chế tạp trước khi cho kết quả dương tính. Một trong số các mẫu âm tính với P. falciparum qua kỹ thuật PCR, có lẽ do nhiễm tạp DNA tách chiết.

Nói chung, thử nghiệm Vectest, ELISA và PCR có tính khả thi, trong đó PCR có ích trong việc xác định hay khẳng định lại kết quả cho các test miễn dịch, nhất là trường hợp dương tính giả, song cũng chú ý loại bỏ tạp nhiễm trước khi thực hiện PCR.

Một nghiên cứu được thực hiện ở Trung tâm bệnh truyền nhiễm mới nỗi và an toàn sinh học, Đại học y khoa Texas, Mỹ. Nghiên cứu này nhằm so sánh về độ nhạy của que nhúng phát hiện kháng nguyên Vectest với kỹ thuật RT-PCR (Reverse transcriptase-PCR) và nuôi cấy tế bào để phát hiện virus West Nile ở những con chim bị chết ở phía Tây Texas, Mỹ. Trong đó, nuôi cấy tế bào được xem là chuẩn vàng để so sánh vì nó đặc hiệu nhất và tỷ lệ dương tính cao nhất.

Nuôi cấy trực tiếp các mô não của chim và thử nghiệm que nhúng với virus WNV, thông qua ngoáy họng lấy chất tiết, so sánh kết quả cho biết là dương tính lần lượt của 2 thử nghiệm là 46% và 40%. Ngược lại, kỹ thuật RT-PCR làm trên các não cho độ nhạy thấp hơn phương pháp nuôi cấy mô trực tiếp (33% vs. 46%).

Kết quả trên chỉ ra rằng kỹ thuật RT-PCR không thể để thực hiện làm trên các chim chết như vậy và thử nghiệm Vectest có một số ưu điểm để chọn làm thử nghiệm thường quy giám sát bệnh do virus này gây ra hơn 2 loại thử nghiệm còn lại. Dưới đây là một số kết quả do các nhà khoa học thuộc chương trình côn trùng y học, đã so sánh các test với nhau trong giám sát vector nhiễm bệnh, với số mẫu rất lớn là 857 mẫu muỗi trong các mùa truyền bệnh khác nhau:

TT	Mã bệnh	Thời gian	Điểm nghiên cứu	Thử nghiệm	Kết quả	Muỗi
1	141	6/13-14/2007	Wheeling	PCR*	WNV	Culex
2	209	6/22-25/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
3	232	6/26-28/2007	Glenview	PCR*	WNV	Culex
4	293	7/6-8/2007	Prospect Heights	PCR*	WNV	Culex
5	308	7/6-8/2007	Des Plaines	VecTest/PCR*	WNV	Culex
6	316	7/9/2007	Elk Grove	VecTest/PCR*	WNV	Culex
7	323	7/6-10/2007	Northbrook	PCR*	WNV	Culex
8	331	7/10/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
9	333	7/11/2007	Streamwood	VecTest/PCR*	WNV	Culex
10	366	7/13-15/2007	Glenview	PCR*	WNV	Culex
11	367	7/13-15/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
12	372	7/16/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
13	376	7/16-17/2007	Wheeling	PCR*	WNV	Culex
14	381	7/16-17/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
15	387	7/17/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
16	396	7/13-19/2007	Northbrook	PCR*	WNV	Culex
17	410	7/19/2007	Northbrook	VecTest/PCR*	WNV	Culex
18	411	7/18-19/2007	Glenview	PCR*	WNV	Culex
19	412	7/19/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
20	413	7/18/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
21	414	7/18-19/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
22	420	7/20-22/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
23	435	7/23/2007	Glenview	PCR*	WNV	Culex
24	440	7/23/2007	Northbrook	PCR*	WNV	Culex
25	444	7/24/2007	Buffalo Grove	VecTest/PCR*	WNV	Culex
26	446	7/23/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
27	449	7/23-24/2007	Park Ridge	VecTest/PCR*	WNV	Culex
28	453	7/24/2007	Hoffman Est.	PCR*	WNV	Culex
29	454	7/24/2007	Arl. Heights	PCR*	WNV	Culex
30	469	7/25/2007	Wheeling	PCR*	WNV	Culex
31	472	7/24-25/2007	Elk Grove	PCR*	WNV	Culex
32	473	7/25-26/2007	Elk Grove	VecTest/PCR*	WNV	Culex
33	474	7/26/2007	Glenview	VecTest/PCR*	WNV	Culex
34	475	7/25/2007	Elgin	PCR*	WNV	Culex
35	477	7/19-7/25/2007	Schaumburg	PCR*	WNV	Culex
36	483	7/25/2007	Hoffman Est.	PCR*	WNV	Culex
37	484	7/27-29/2007	Northbrook	VecTest/PCR*	WNV	Culex
38	485	7/26-7/28/2007	Glenview	PCR*	WNV	Culex
39	486	7/26-7/28/2007	Park Ridge	PCR*	WNV	Culex
40	492	7/30/2007	Prospect Heights	VecTest	WNV	Culex
41	506	7/31/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
42	509	7/31/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
43	517	7/31/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
44	522	8/1/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
45	524	8/1/2007	Des Plaines	VecTest	WNV	Culex
46	528	7/31-8/2/2007	Bartlett	VecTest	WNV	Culex
47	533	8/2/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
48	535	7/31-8/2/2007	Prospect Heights	VecTest	WNV	Culex
49	536	8/2/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
50	542	8/2/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
51	546	8/1-8/2/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
52	551	8/3-8/5/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
53	553	8/3-8/5/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
54	554	8/3-8/5/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
55	562	8/6-8/7/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
56	565	8/6-8/7/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
57	567	8/6-8/7/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
58	571	8/8-8/9/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
59	573	8/8-8/9/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
60	576	8/8-8/9/2007	Glenview	VecTest	WNV	Culex
61	582	8/3-8/9/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
62	585	8/8-8/9/2007	Park Ridge	VecTest	WNV	Culex
63	586	8/8-8/9/2007	Hoffman Estates	VecTest	WNV	Culex
64	590	8/10-8/12/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
65	592	8/10-8/12/2007	Glenview	VecTest	WNV	Culex
66	594	8/13/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
67	596	8/14/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
68	598	8/10-8/14/2007	Elgin	VecTest	WNV	Culex
69	602	8/13-8/16/2007	Palatine	VecTest	WNV	Culex
70	603	8/13-8/16/2007	Hoffman Estates	VecTest	WNV	Culex
71	604	8/10-8/16/2007	Prospect Heights	VecTest	WNV	Culex
72	607	8/15-8/16/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
73	609	8/10-8/16/2007	Des Plaines	VecTest	WNV	Culex
74	612	8/13-8/16/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
75	613	8/10-8/16/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
76	616	8/10-8/16/2007	Park Ridge	VecTest	WNV	Culex
77	617	8/15-8/16/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
78	618	8/10-8/16/2007	Wheeling	VecTest	WNV	Culex
79	621	8/17-8/19/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
80	622	8/17-8/19/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
81	625	8/20/2007	Arl. Heights	VecTest	WNV	Culex
82	626	8/17-8/20/2007	Park Ridge	VecTest	WNV	Culex
83	627	8/17-8/20/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
84	628	8/17-8/21/2007	Glenview	VecTest	WNV	Culex
85	629	8/20-8/21/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
86	630	8/17-8/21/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
87	633	8/21/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
88	636	8/22/2007	Streamwood	VecTest	WNV	Culex
89	639	8/21-8/22/2007	Park Ridge	VecTest	WNV	Culex
90	640	8/21-8/22/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
91	642	8/20-8/23/2007	Prospect Heights	VecTest	WNV	Culex
92	650	8/17-8/23/2007	Des Plaines	VecTest	WNV	Culex
93	659	8/22-8/23/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
94	660	8/22-8/23/2007	Glenview	VecTest	WNV	Culex
95	675	8/24-8/30/2007	Schaumburg	VecTest	WNV	Culex
96	674	8/24-8/30/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
97	679	8/24-8/30/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
98	680	8/24-8/30/2007	Glenview	VecTest	WNV	Culex
99	681	8/24-8/27/2007	Des Plaines	VecTest	WNV	Culex
100	690	8/29-8/30/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
101	691	8/27-8/30/2007	Wheeling	VecTest	WNV	Culex
102	693	8/27-8/30/2007	Hoffman Estates	VecTest	WNV	Culex
103	694	8/29/2007	Hoffman Estates	VecTest	WNV	Culex
104	707	8/31-9/5/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
105	713	9/6/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
106	725	8/31-9/6/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
107	737	9/7-9/13/2007	Northbrook	VecTest	WNV	Culex
108	740	9/7-9/13/2007	Elk Grove	VecTest	WNV	Culex
109	768	9/17-9/18/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
110	795	9/21-9/23/2007	Barrington	VecTest	WNV	Culex
111	805	9/24-9/25/2007	Buffalo Grove	VecTest	WNV	Culex
112	808	9/21-9/25/2007	Rolling Meadows	VecTest	WNV	Culex
113	813	9/25-9/27/2007	Wheeling	VecTest	WNV	Culex
114	814	9/24-9/27/2007	Palatine	VecTest	WNV	Culex

Với những kết quả trên của Vectest, chúng ta có thể hy vọng rằng trong thời gian đến Vectest này sẽ được áp dụng rộng rãi để giám sát và đánh giá sự phân bố của vector sốt rét nhiễm mầm bệnh và có thể dùng thường quy như một loại test chẩn đoán nhanh (RDTs) trong chẩn đoán ký sinh trùng sốt rét ở người hiện nay.

VecTest thích hợp cho phát hiện muỗi sốt rét Anopheles spp. trên thực địa

1.Extensive multiple test centre evaluation of the Vectest malaria antigen panel assay.

2.Marta Moreno, Jorge Cano et al., (2004). Malaria Panel Assay versus PCR: detection of naturally infected Anopheles melas in a coastal village of Equatorial Guinea. Malaria journal, Jul 6;(3).

3.[My paper]J R Ryan, K Dav, E Emmerich et al., (2001). Dipsticks for rapid detection of plasmodium in vectoring anopheles mosquitoes. Med Vet Entomol. 2001 Jun ;15 (2):225-30 11434560.

4.[My paper]K M Collins, L P Hochberg et al., (2004). Quantification of Plasmodium malariae infection in mosquito vectors. Med Parasitol. 2004 Jul ;98 (5):469-72 15257796.

5.M E De Arruda, K M Collins et al., (2004). Quantitative determination of sporozoites and circumsporozoite antigen in mosquitoes infected with Plasmodium falciparum or P. vivax. Ann Trop Med Parasitol. 2004 Mar ;98 (2):121-7 15035722. [My paper]

6.[My paper]M Magris, Y Rubio-Palis et al., (2007). Community-randomized trial of lambdacyhalothrin-treated hammock nets for malaria control in Yanomami communities in the Amazon region of Venezuela. Trop Med Int Health. 2007 Mar ;12 (3):392-403 17313511.

7.R E Coleman, J F Barthet al., (2000). Development and evaluation of a dipstick assay for detection of Plasmodium falciparum and P. vivax sporozoites in mosquitoes (Diptera: Culicidae). Entomol. 2000 Jul ;37 (4):581-7 10916300.

8.Juanita M. Hinson, Sonia Dave, Scott S. McMenamy et al., (2015). Immuno-chromatographic Wicking Assay for the Rapid Detection of Chikungunya Viral Antigens in Mosquitoes (Diptera: Culicidae). J Med Entomol 52 (4): 699-704.

9.Elizabeth Wanja, Zahra F. Parker, Oluwakemi Odusami et al., (2014). Immuno-chromatographic wicking assay for the rapid detection of dengue viral antigens in mosquitoes (Diptera: Culicidae), J Med Entomology 51(1), 220-225..

10.W.C. Wilson, H.M. Weingartl, B.S. Drolet, K. Davé et al., (2013). Diagnostic approaches for Rift Valley fever: Vaccines and diagnostics for transboundary animal diseases. Dev Biol (Basel). Basel, Karger, 135, 73-78.

11.Elizabeth Wanja, Zahra Parker, Tobin Rowland, Michael J. Turell et al., (2011). Field evaluation of a wicking assay for the rapid detection of Rift Valley fever viral antigens in mosquitoes. Journal of the American Mosquito Control Association 27(4):370-375.

12.M. Turell, K. Davé,M. Mayda, Z. Parker, R. Coleman, S. Davé, D. Strickman (2011). Wicking Assay for the Rapid Detection of Rift Valley Fever Viral Antigens in Mosquitoes (Diptera: Culicidae)., Journal of medical entomology, Volume 48, Number 3, pp. 628-633(6).

15.Roger S. Nasci, Kristy L. Gottfried, Kristen L. Burkhalter, Jeffrey R. Ryan, Eva Emmerich and KirtiDavé (2003). Sensitivity of the VecTest antigen assay for Eastern Equine Encephalitis and Western Equine Encephalitis viruses. Journal of American Mosquito Control Association 19 (4): 440-444.

18.M. Bangs, S. Rusmarto, Y. R. Gionar,A.S.T. Chan, K. Dave and J.R. Ryan (2002). Evaluation of a dipstick malaria sporozoite panel assay for detection of natually infected mosquitoes. J. Med Ento 39, pp324-330.

19.J. R. Ryan, K. Dave, E. Emmerich, L. Garcia, L. Yi, R. E. Coleman, J. Sattabongkot, R. F. Dunton, A. S. T. Chan and R. A. Wirtz (2001). Dipsticks for rapid detection of Plasmodium spp. in vectoring Anopheles mosquitoes. Med. and Vet. Entomology 15, 225-230 (2001).